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傳統熒光顯微鏡使用熒光物質標志細胞中的特定結構，不僅圖像與背景的對比度增強，而且由于許多熒光顯微鏡的光源使用短波長的紫外光，大大提高了分辨率。但當所觀察的熒光標本稍厚時，傳統熒光顯微鏡一個難以克服的缺點就顯現出來：焦平面以外的熒光使得圖片模糊、發虛，對比度降低。圖1.共聚焦光路激光共聚焦顯微鏡恰恰是為解決這個問題應運而生，科學家在光路中放置一個Pinhole，利用這個Pinhole阻擋焦平面以外的熒光，提高對比度。

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